牛冷凍精液的保存及使用   MVE液氮罐

精液冷凍保存是將精液進行特殊處理，保存在超低溫下，以達到長期保存的目的。通常采用液氮(—196℃)和干冰(—79℃)保存。其最大優點是可長期保存，使用不受時間、地域以及種用雄性動物壽命的限制。可充分提高公牛的利用率。現將冷凍精液保存起來和怎樣進行解凍及給母牛輸精的有關技術操作介紹如下，供參考。

一、稀釋液的配方：

12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黃液20毫升。

二、稀釋方法：

將經過檢查合格的精液(活力0?6以上、精子密度中等)按1：2—5倍稀釋液進行稀釋，其稀釋原則應保證每個顆粒精液中所含精子數不少于3000—4000萬個，解凍后呈直線前進運行的精子不少于1500萬個。

三、冷凍：

在裝有液氮的容器上置一銅紗網，距液氮面2厘米左右，使溫度維持在—80℃至—100℃。將平衡后的精液用滴管按一定量(0?1毫升)滴于銅紗網、滴完最后一滴停3—5分鐘后，當精液顆粒顏色變白時，立即浸入液氮，并將全部顆粒取下，收集于貯精瓶或紗網布袋內，并做好標記，然后立即移入液氮罐中貯存。

四、解凍：MVE液氮罐

將預先配制好的2?9%檸檬酸的溶液1毫升，放入干凈的小試管中，再置于40℃左右的溫水杯中，迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動至化凍時，從水杯中取出試管，接著檢查精液活力，不低于0?3即為合格品。

五、重視保精、快速解凍與鏡檢

1、根據液氮罐的性能要求，定期添加液氮罐內盛裝凍精的提筒不能露在液氮面外。

2、取精時，盡可能用長鑷子，切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右)。

3、從液氮中取出細管凍精時，要輕輕甩1—2下，將塑料細管的棉塞端放入35—40℃的溫水中，把封口端留在水外1—1?3厘米外，待管內精液融化一半時，立即取出備用。

4、解凍后的精液鏡檢時，精子的活力不低于0?3方可用于輸精，才能確保正常受精。

5、解凍后的精液應立即輸配，不宜停放時間過長，應做到現解凍、現輸精。

六、適時輸精  MVE液氮罐

母牛正常排卵是在發情結束后6—12小時，精子在母牛生殖道的存活時間為12—20小時，且還需要4—6小時的獲能過程，才能與卵子結合受精。精子15分鐘就會到達輸卵管受精部位，因此，讓精子早于卵子到達輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。

1、適宜的輸精時間：是在母牛的發情后期。此時母牛表現：精神平穩，******部腫脹消失，****不再流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大，表面緊張，有一觸即破之感。此時為最佳輸精時機。

2、適宜的輸精部位：是在子宮頸內口1厘米處即子宮體基部，過淺易導致精液外流，過深易損傷子宮內粘膜。

3、適宜的輸精方法：直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定，左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端，右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5—10厘米(以避開尿道口)再改為平插送到子宮頸口，緩慢越過子宮頸管中的皺壁，到達子宮頸基部，徐徐注入精液后，緩緩抽出輸精器。

4、適宜的輸精次數：以1—2次為宜。可在發情母牛發情高潮后，黃牛在發情高潮后6—12小時，水牛在發情高潮后18—20小時進行第一次輸精，前后間隔8—12小時再進行第二次輸精。